A-431(人表皮癌細(xì)胞)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
A-431(人表皮癌細(xì)胞)細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒規(guī)格：50次

大鼠子宮頸上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

293E(人胚腎細(xì)胞（EBNA1基因修飾）)5×106cells/瓶×2

BCA蛋白定量試劑盒500次國(guó)產(chǎn)

人惡性黑色素瘤細(xì)胞英文名稱：A375

P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Eca-109(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人盲腸腺細(xì)胞（未分）英文名稱：Hce-8693

亞碲酸鹽卵黃增菌液/Egg-Yolk Tellurite Emulsion金黃色葡萄球菌的選擇性分離；貝爾德-帕克基礎(chǔ)配套試劑50毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上細(xì)胞

人食管細(xì)胞英文名稱：KYSE450

瓊脂粉/寒天/瓊脂/洋菜/石花菜/瓊膠/AgarBR，強(qiáng)度1200g/c㎡500/2500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

MCF-7 [MCF7], 人腺細(xì)胞系
A-431(人表皮癌細(xì)胞)AngioSense 750 EX

AngioSPARK 680

AngioSPARK 750

GastroSense 750

Genhance 680 (1 mg)

Genhance 680 (5 mg)

Genhance 750 (1 mg)

Genhance 750 (5 mg)
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