異檸檬酸(ICA)含量試劑盒(酶法)說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活結(jié)合1抗體細(xì)胞S相激相關(guān)抗體可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)22A17抗體
更新時(shí)間：2025-06-30
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
異檸檬酸(ICA)含量試劑盒(酶法)說明書 | 紫外分光光度法 紫外分光光度法 微板法 微板法 | 24樣 48樣 48樣 96樣 | AS273 |
試劑組成和配制
提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體×5 瓶，-20℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加入4.5mL試劑二充分混勻。(3天使用完)
樣品處理
1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g 離心 5min，取全部上清于 4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于 1mL 試劑一。
2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后于4℃，10000g 離心5min，取全部上清于4℃、100000g 離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。
3. 血清：直接測定。
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡便：操作時(shí)間短，48-50T，可測40例樣本左右，96-100T,可測80例樣本左右；
2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測，部分試劑盒取樣多少請；
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效；
4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；
5、回收試驗(yàn)： X =99%；
6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)；
7、測試面廣：可測動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
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